神经干细胞与RPE细胞的线粒体交换及其对RPE细胞增生和能量代谢的影响

更新时间:2015-08-18

【摘要】 背景研究表明，干细胞可通过与损害靶细胞进行线粒体交换的方式修复受损细胞。视网膜色素变性疾病是以视网膜色素上皮( RPE)细胞凋亡为病理基础的眼病，干细胞是否能够通过上述机制进行治疗尚不清楚。  目的  研究神经干细胞( NSCs)能否通过线粒体交换机制改善RPE细胞的增生和能量代谢功能。方法分离Long-Evans大鼠的视网膜进行RPE细胞的培养和传代，取第3代细胞用于实验，采用荧光显微镜检测RPE细胞中RPE65和Bestrophin蛋白的表达。小鼠NSCs C17.2细胞系和带绿色荧光蛋白(GFP)的C17.2细胞（GFP-C17.2细胞）进行培养和传代。分别采用线粒体特异性染色剂Mitotracker-green和Mitotracker-red标记RPE细胞和NSCs线粒体。将RPE细胞与小鼠NSCs进行共培养，用麦胚凝集素(WCA)标记隧道纳米管( TNT)，于激光扫措共焦显微镜下观察共培养的RPE细胞与小鼠NSCs间TNT中线粒体交换方式；采用流式细胞术检测RPE细胞与NSCs共培养前后的细胞周期改变；采用高效液相色谱(HPLC)技术检测共培养前后RPE细胞中ATP、ADP和AMP的质量分数。

【关键词】 干细胞 眼色素上皮／细胞学 视网膜变性／治疗 细胞培养 共培养技术 线粒体／代谢 隧道纳米管 动物

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