角膜基质细胞诱导分化的脂肪间充质干细胞羊膜片移植治疗兔角膜碱烧伤的疗效及其机制

更新时间:2015-08-18

【摘要】景 角膜化学烧伤是致盲眼病之一,先前的各种疗法在临床上的应用均受到一定的限制,而脂肪间充质干细胞(ADSCs)移植疗法受到密切关注. 目的 观察诱导分化的ADSCs羊膜片移植治疗兔角膜碱烧伤的疗效及其机制.方法 无菌条件下剪取兔角膜,用悬浮基质片法分离并培养兔角膜基质细胞(CSCs).取兔腹股沟脂肪组织,以酶消化法(质量分数0.25％胰蛋白酶)分离及培养 兔ADSCs,并用流式细胞术鉴定ADSCs表面抗原的表达.将CSCs与ADSCs共培养,采用免疫荧光技术和逆转录PCR(RT-PCR)鉴定 CSCs诱导后ADSCs向角膜基质样细胞分化的表达,分别将诱导或未诱导的ADSCs种植于羊膜上制备成细胞羊膜片.选择60只新西兰白兔,右眼用浸有 质量分数1％ NaOH的滤纸贴敷于角膜中央50 s制备兔角膜碱烧伤模型,按随机数字表法将模型眼随机分为诱导ADSCs+羊膜移植组、未诱导ADSCs±羊膜移植组、单纯羊膜移植组及模型组.分别于术 后1周、2周和1个月在裂隙灯显微镜下观察各组兔模型眼角膜的混浊程度和新生血管形成情况,并对角膜炎症进行评分,采用ELISA法检测术后1个月角膜组 织匀浆中CD45、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)蛋白及房水中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的质量浓度.

【关键词】 脂肪间充质干细胞 知识脉络 移植 知识脉络 羊膜 知识脉络 眼碱烧伤 知识脉络 分化 知识脉络 角膜基质细胞 知识脉络

阅读全文